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植物葉綠素的測定方法以及步驟

來源: http://www.hfhdjx.com/  類別:技術(shù)文章  更新時間:2013-12-03  閱讀
 植物葉綠素的測定方法以及步驟
葉綠素是一類與光合作用(photosynthesis)有關(guān)的最重要的色素。光合作用是通過合成一些有機化合物將光能轉(zhuǎn)變?yōu)榛瘜W能的過程。葉綠素實際上存在于所有能營造光合作用的生物體,包括綠色植物、原核的藍綠藻(藍菌)和真核的藻類。葉綠素從光中吸收能量,然后能量被用來將二氧化碳轉(zhuǎn)變?yōu)樘妓衔铩?BR>    植物葉綠素的測定方法:
   (1)材料:新鮮(或烘干)的植物葉片。
   (2)儀器設(shè)備:1)分光光度計;2)電子頂載天平(感量0.01g);3)研缽;4)棕色容量瓶;  5)小漏斗;6)定量濾紙;7)吸水紙; 8)擦境紙;9)滴管。
   (3)試劑:1)95%乙醇(或80%丙酮)(v丙酮:v乙醇=2:1的95%水溶液);2)石英砂;3)碳酸鈣粉。 暗中2h,0.5g,25ml
   (4)取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,剪碎(去掉中脈),混勻。
   (5)稱取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,分別放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml 95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10ml, 繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min。
   (6)取濾紙1張,置漏斗中,用乙醇濕潤,沿玻棒把提取液倒入漏斗中,過濾到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇沖洗研缽、研棒及 殘渣數(shù)次,最后連同殘渣一起倒入漏斗中。
   (7)用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。最后用乙醇定容至25ml,搖勻。
   (8)把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi),以95%乙醇為空白,在波長663nm和645nm下測定吸光度。
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